μ- NOTA 34
By Víctor Deroncelé
Se presenta el caso de un niño de 4 años que acude al servicio de urgencias con un cuadro caracterizado por diarrea hemorrágica, fiebre moderada y dolor abdominal cólico. El paciente presenta entre 4 y 6 deposiciones al día, de volumen bajo y con presencia de moco, lo que sugiere una inflamación del intestino, sin embargo, la sangre observada no es abundante ni de color rojo brillante, diferenciándose de lo que se vería en infecciones por Escherichia coli enterohemorrágica. Además, el niño manifiesta tenesmo y pujo, síntomas característicos de la shigelosis, y el dolor abdominal se localiza predominantemente en la fosa ilíaca izquierda. El paciente vive en una zona con limitaciones en el acceso a agua potable y saneamiento, y se ha detectado que otros niños del entorno han presentado síntomas similares, lo cual refuerza la sospecha de transmisión persona a persona. Los hallazgos de la exploración física evidencian deshidratación leve (mucosas secas y fontanela ligeramente hundida) y un recuento de leucocitos normal o levemente elevado, apoyando el diagnóstico de shigelosis. Ante este escenario, es crucial identificar con precisión el agente patógeno para orientar el tratamiento y establecer medidas de control preventivo.
- Metodología Microbiológica
Muestras Obtenidas
- Tipo de muestra:
- Muestra fecal.
- Método de recolección:
- Recolección en recipiente estéril siguiendo protocolos de bioseguridad, para evitar contaminación y asegurar la integridad de la muestra.
Justificación de las Pruebas Microbiológicas
Ante la sospecha de infección por un patógeno entérico que causa diarrea hemorrágica con tenesmo y pujo, se optó por un enfoque que combine métodos de cultivo, pruebas bioquímicas, técnicas moleculares y confirmación mediante MALDI-TOF. La elección de este abordaje se fundamenta en:
- Diferenciación fenotípica: Utilizar el Agar XLD, que permite identificar la producción de H₂S, junto con la evaluación de la fermentación de carbohidratos, para distinguir a Shigella dysenteriae de otros patógenos entéricos.
- Detección molecular: La PCR para el gen ipaH es crucial, ya que este marcador es específico de Shigella spp. y confirma su alta capacidad invasiva.
- Confirmación rápida: El uso de MALDI-TOF permite corroborar la identidad del microorganismo de forma rápida y precisa, facilitando la intervención clínica oportuna.
Cultivo y Aislamiento
- Medio de cultivo utilizado:
- Agar XLD (Xilosa Lisina Desoxicolato).
- Condiciones de incubación:
- 37 °C durante 24-48 horas en condiciones aerobias.
Pruebas Bioquímicas
- Fermentación de carbohidratos:
- Se evalúa la capacidad del microorganismo para fermentar xilosa y otros azúcares, lo cual ayuda a diferenciar el perfil bioquímico del patógeno.
- Prueba de H₂S:
- Se determina la producción de sulfuro de hidrógeno; en este caso, la formación de un centro rojo y borde oscuro en el Agar XLD es indicativo de esta característica.
Métodos Moleculares
- PCR:
- Se realizó la detección del gen ipaH, marcador característico de Shigella spp., mediante amplificación de secuencias específicas del ADN del patógeno.
MALDI-TOF
- Aplicación:
- Se utilizó la espectrometría de masas MALDI-TOF para identificar el microorganismo basándose en su perfil proteico único, proporcionando una confirmación precisa a nivel de especie.
Antibiograma
El antibiograma se realizó de manera rutinaria para determinar el perfil de susceptibilidad del aislado y orientar las decisiones terapéuticas. Este estudio es fundamental para:
- Determinar la eficacia de los antibióticos: Permite seleccionar el tratamiento más adecuado.
- Monitorizar la resistencia: Ayuda a controlar y prevenir la propagación de cepas resistentes en la comunidad.
(Los resultados específicos del antibiograma se presentan en la sección de resultados si fueran realizados; en este caso, se asume que se siguieron los protocolos de rutina en el laboratorio.)
2. Resultados
| Prueba | Resultado |
| Crecimiento en Agar XLD | Colonias con centro rojo y borde oscuro, indicativo de producción de H₂S |
| Prueba de fermentación de carbohidratos | Resultados compatibles con patógenos entéricos |
| Prueba de H₂S | Positiva |
| PCR (gen ipaH) | Positiva, confirmando la presencia de Shigella spp. |
| Identificación mediante MALDI-TOF | Confirmación de la identidad de Shigella dysenteriae |
| Antibiograma | Realizado de rutina para orientar la terapia (perfil de resistencia documentado según protocolos CLSI) |
- Análisis de Resultados
- La presencia del gen ipaH detectado mediante PCR confirma de forma específica la presencia de Shigella spp., lo cual es fundamental en cuadros de diarrea hemorrágica.
- La producción de H₂S en el Agar XLD, manifestada por el centro rojo y borde oscuro de las colonias, y la evaluación de la fermentación de carbohidratos apoyan el perfil bioquímico de Shigella dysenteriae.
- La identificación mediante MALDI-TOF refuerza la precisión diagnóstica, permitiendo una rápida confirmación del microorganismo.
- El antibiograma, realizado de rutina, permite conocer el perfil de susceptibilidad del aislado, lo que es esencial para orientar el tratamiento antibiótico y reducir la morbilidad en la población pediátrica.
- Los detalles epidemiológicos, como la baja frecuencia de deposiciones (4-6 al día) con presencia de moco, la ausencia de abundante sangre macroscópica, y la presencia de tenesmo y pujo, distinguen este cuadro clínico de otros, como el causado por Escherichia coli enterohemorrágica o Campylobacter.
- Los antecedentes de contacto con otros casos y las condiciones socioambientales adversas refuerzan la importancia de implementar medidas preventivas y de control para evitar brotes.
- Identificación del Organismo
La integración de los hallazgos obtenidos –resultados positivos en la PCR para el gen ipaH, el crecimiento característico en Agar XLD con producción de H₂S, la confirmación mediante MALDI-TOF y el soporte de las pruebas bioquímicas– permite concluir que el patógeno responsable de la infección es Shigella dysenteriae.
- Referencias
- Clinical and Laboratory Standards Institute. (2022). CLSI Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing M100 (32ª ed.).
- Tarr, P. I., et al. (2005). Shiga-toxin-producing Escherichia coli and haemolytic uraemic syndrome. Lancet, 365(9464), 1073-1086.